《甲基绿派洛宁染色法观察细胞DNA RNA分布》由会员分享，可在线阅读，更多相关《甲基绿派洛宁染色法观察细胞DNA RNA分布（2页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流
甲基绿派洛宁染色法观察细胞DNA RNA分布
.....精品文档......
甲基绿派洛宁染色法观察细胞DNA RNA分布
实验目的
1. 学会制作血涂片
2. 熟悉甲基绿——派洛宁法显示核酸的原理与操作步骤
3. 观察 DNA、RNA 在细胞中的分布。
实验原理
1． 电离作用：脱氧核糖核酸和核糖核酸都有磷酸基，又有碱基，故为两性电解质。在一定的条件下，可以电离而带电荷，因此都有一定的等电点。
甲基绿、派洛宁为两种碱性染料，在水中电离后，都产生带阳电荷的离子，常与带负电荷的磷酸根形成盐键。
2、
甲基绿电离后，在五价氮处产生二个正电荷，碱性较强，易与双链 DNA 分子（胞核等电点 pH3.8～4.2） 进行极性吸着而结合，使 DNA 显示绿色； 派洛宁电离后仅产生一个正电荷， 碱性较甲基绿弱， 与单链 RNA （胞质等电点 pH4.6～5.2）吸附结合，使 RNA 显示红色。
2． 聚合作用：甲基绿对聚合高的DNA有亲和力，派洛宁对聚合低的RNA有亲和力。因此，甲基绿选染 DNA，而派洛宁选染 RNA。
实验材料
1. 蟾蜍红细胞
2. 70%酒精 95%酒精 甲基绿派洛宁染色剂（5:3）
3. 载玻片 镊子 剪刀 托盘 显微镜 手套
实验步骤
1．取蟾蜍（蟾蜍
3、破髓，仰位剪去下颌、舌头）制备血涂片，干燥后滴加 70%的乙醇溶液固定 10 分钟，晾 干。
2．滴染色液于血膜上，染 15 分钟。 （或在染色缸中）
3．蒸馏水冲洗，去染液。
4．向染色液血膜滴加 95%乙醇溶液分色、同时倾斜载片弃液体，晾干。
5. 观察。
B
A
实验结果
A．10倍下的染色后的蟾蜍血细胞
B．40倍下的染色后的蟾蜍血细胞
显微镜下可观察到细胞核被染成紫色，细胞质被染成蓝色。
讨论与结论
1.制作血涂片的时候，要注意推片的角度，力度，速度，使血细胞分布均匀，厚薄适宜。
2.要注意分色的时间和次数掌控，时间过长次数过多会导致观察到的血细胞染色不明显。
3.染色效果不是很理想，可能是由于染液中甲基紫的含量较高。
甲基绿派洛宁染色法观察细胞DNA RNA分布
