《DNS法测还原糖》由会员分享，可在线阅读，更多相关《DNS法测还原糖（1页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、1、分析试剂
DNS显色剂每lOOOmlDNS溶液含有酒石酸钾钠182g,无水亚硫酸钠3g,氢氧化钠 20g, 3, 5 —二硝基水杨酸6.3g，重蒸馏酚4g。配后过滤放置半月后使用。
1%葡萄糖标准溶液：准确称取lOOmg葡萄糖，用少量蒸馏水溶解后定容至100m 1,冰 箱保存备用.
10%ZnSO4 溶液.
2、器材
分光光度计,定糖管,移液管,容量瓶,烧杯,电炉等。
［方法步骤］
(一)葡萄糖标准曲线的绘制
取 9 只定糖管(有盖子,且用绳子系住),分别按照下表 1 的顺序加入各种试剂,沸水
浴中加热5min,后立即流动水冷却。
管内溶液混匀，用空白管溶液调零点，52
2、0nm测定光密度值(O.D.),以葡萄糖含量为 横坐标,光密度值为纵坐标绘制葡萄糖溶液标准曲线。
表 1 制作葡萄糖标准曲线时各试剂用量
项目
CK
1
2
3
4
5
6
7
8
含糖总量(mg)
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
1.4
1.6
葡萄糖液(ml)
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
1.4
1.6
蒸馏水(ml)
2.0
1.8
1.6
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
DNS 试剂(m1)
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
加热
均在沸水浴中加热5min
冷却
立即用流动冷水冷却
蒸馏水(ml)
21.5
21.5
21.5
21.5
21.5
21.5
21.5
21.5
21.5
光密度(520nm)
二)样品测定
样品液适当稀释，使糖浓度为0.1-1.0mg/m 1,取稀释后的糖液1.0ml于15ml刻度试管 中，加DNS试剂2.0m 1,沸水煮沸2min,冷却后用水补足到15ml刻度，在540nm波长下 测定吸光度。从标准曲线查出葡萄糖mg/ml数。求出样品中糖含量。
DNS法测还原糖
