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1、电泳相关溶液的配置：
1、 30%丙稀酰胺混合溶液（100ml）：称取29g丙稀酰胺和1g bis丙稀 酰胺，用水溶解定容到100ml，过滤，4摄氏度保存一个月。
2、 5XSDS 电极缓冲液：称取 Tris base15.1g，甘氨酸 94.g, SDS 5.g 加 dH2O 定容至 1000ml。
3、 2X样品缓冲液（10ml）:甘油2ml,溴酚蓝0.0202g, 1MTris・Cl （pH6.8） 1ml 巯基乙醇 0.14ml, 10%SDS 4ml。
4、 染色液的配制（1000ml）:
用量筒分别量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸；在电子天平上称 取0.125%考
2、马斯亮蓝R250 1.25g，再将其——加到1000ml锥形瓶中， 用蒸馏水加以补足至1000m l。加入的先后顺序为：考马斯亮蓝R250, 甲醇或者乙醇,蒸馏水,乙酸。充分混匀后进行过滤,收集滤液备用。 当过滤速度变慢时要更换滤纸,快速过滤完,不可隔夜以免影响染色效 果。
5、 脱色液（1000ml）:
用量筒分别量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸、670ml蒸馏水加 入烧杯中,待溶液混和均匀后加入盛脱色液的广口瓶；备用。
收集液的SDS-PAGE分析：
1、取20ul收集液，加入5X样品缓冲液5ul,在80°C水浴锅中煮5min。
Resolving Gel (10ml)
3、
6%
8%
10%
12%
15%
H2O
5.4
4.7
4.1
3.4
2.4
30% acrylamide mix
2.0
2.7
3.3
4
5
4x resolving-gel buffer
2.5
2.5
2.5
2.5
2.5
20% SDS
0.05
0.05
0.05
0.05
0.05
20% APS
0.05
0.05
0.05
0.05
0.05
TEMED 0.0080.0060.0040.0040.004
浓缩胶配方(10ml)
H2O 6.9 ml
30% acrylamide mix 1.7 ml
8x stacking-gel buffer 1.25 ml
20% SDS 0.05 ml
20% APS 0.05 ml
TEMED 0.01 ml
2、 按照上面配方制SDS-PAGE凝胶，安装好电泳仪，在槽中加入电极缓 冲液。
3、 按一定顺序在加样孔中加入样品。
4、 打开电源将电压调到80v，待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至 样品电泳到胶底部为止。
5、 将凝胶小心取下放入容器中，加入染色液，用摇床摇2-3h
6、 待条带清晰后倒出染色液，加入脱色液过夜
7、 将脱色液倒掉，在灯箱下观察 8、用数码相机拍照，分析。
SDS-PAGE电泳相关溶液的配置
