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1、福建省疾病预防控制中心福建省疾病预防控制中心杨式芹杨式芹一、概况 1911年年Rous和和Murphy首先应用鸡胚首先应用鸡胚培养研究肉瘤病毒培养研究肉瘤病毒(Rous肉瘤肉瘤)的繁殖。的繁殖。1938年年Goodpasture和和Burnet等应用等应用鸡胚繁殖病毒、鸡胚繁殖病毒、Cox应用卵黄囊培养立克应用卵黄囊培养立克次氏体。次氏体。鸡胚培养法的鸡胚培养法的优点优点：1.它的组织分化程度低，可选择适当途径它的组织分化程度低，可选择适当途径接种，病毒易复制，感染病毒的膜和液体接种，病毒易复制，感染病毒的膜和液体含大量病毒。含大量病毒。2.是个整体，有神经血管的分布及脏器的是个整体，有神经血
2、管的分布及脏器的构造。构造。3.来源充足，操作简单，通常是无菌的，来源充足，操作简单，通常是无菌的，对接种的病毒不产生抗体。对接种的病毒不产生抗体。鸡胚培养法的鸡胚培养法的缺点缺点：1.一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征。征。2.卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。3.某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传递到鸡胚。递到鸡胚。4.通常鸡胚常常含有白血病病毒。通常鸡胚常常含有白血病病毒。5.在鸡食物中加入抗菌素，母鸡吃后会传递给鸡在鸡食物中加入抗菌素，母鸡吃后会传递给
3、鸡胚，鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵胚，鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵抗。抗。二、鸡胚的结构与生理 鸡胚是由三个胚层发育起鸡胚是由三个胚层发育起来的，即来的，即外胚层外胚层，中胚层中胚层和和内内胚层胚层，它们构成胚胎的组织与，它们构成胚胎的组织与器官。器官。（约（约10日龄鸡胚的结构见图）日龄鸡胚的结构见图）三、材料（一）（一）711日龄鸡胚日龄鸡胚（二）孵卵箱（二）孵卵箱（三）检卵灯、开卵钻和卵盘（三）检卵灯、开卵钻和卵盘（四）其它（四）其它四、接种技术（一）活胚检查（一）活胚检查 1.血管血管：活胚可见清晰的血管，有时可见血管搏动，死胚血管模糊成淤血带或淤血块。2.胎动胎动
4、：活胚可见明显的自然运动，尤其在转动胚胎时，死胚见不到任何胎动，胚胎发红像出血样，有的呈现黑块。3.血管网是否丰满血管网是否丰满：发育好的鸡胚可见密布丰满的血管网，也就是绒毛尿囊膜，死胚则见不到这一现象。（二）接种途径（二）接种途径1.尿囊腔接种尿囊腔接种：该途径一般用于流感、新城鸡瘟病毒和腮腺炎的适应和传代。2.羊膜腔接种羊膜腔接种：这途径主要用于临床材料（如患者的鼻洗液及咽漱液）分离病毒。3.卵黄囊接种卵黄囊接种：该接种途径主要用于抗流感病毒药物实验。4.绒毛尿囊膜绒毛尿囊膜壳块培养法壳块培养法：该法可用于流感病毒滴定、中和试验和药物实验。五、注意事项 鸡胚为一活的有机体，因此要严格无菌操作，同时动作要仔细，以免造成物理死亡。接种后24小时内死亡应不计结果。Thank you !Thank you !
流感病毒鸡胚培养法
