直接凝集实验 接溶血素制备1

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1、直直 接接 凝凝 集集 实实 验验 -试管法试管法实验原理实验原理l在一定的电解质条件下，将已知的颗粒性在一定的电解质条件下，将已知的颗粒性抗原定量地与一系列倍比稀释的待测血清抗原定量地与一系列倍比稀释的待测血清等量混合，静置一定的时间后，根据各管等量混合，静置一定的时间后，根据各管的凝集程度，判断待检血清中抗体的效价，的凝集程度，判断待检血清中抗体的效价，常用于抗体的半定量检测。常用于抗体的半定量检测。主要试剂与器材主要试剂与器材l待检血清待检血清(含凝集素的血清含凝集素的血清)l1 1 SRBCSRBCl生理盐水生理盐水l3737水浴箱水浴箱 加样枪加样枪 l试管试管实验步骤实验步骤l将血

2、清放在将血清放在65 5min65 5min。l取试管取试管9 9只，排列于试管架上，依次编号。只，排列于试管架上，依次编号。l按表格稀释血清和加样。（按表格稀释血清和加样。（ulul）l各管摇匀后置室温或各管摇匀后置室温或37 10min37 10min，离心，离心500rpm/min 500rpm/min 2-3min2-3min，观察结果。，观察结果。结果观察和判断结果观察和判断l 先看对照管，轻摇动，应为不凝集，红细胞均匀的分散在先看对照管，轻摇动，应为不凝集，红细胞均匀的分散在液体中。液体中。l 再看实验管，轻摇动，在稍微静置一会儿。再看实验管，轻摇动，在稍微静置一会儿。+液体澄清，全部的絮状碎片沉于管底液体澄清，全部的絮状碎片沉于管底+液体轻度混浊，绝大多数絮状碎片沉于管底液体轻度混浊，绝大多数絮状碎片沉于管底+液体半混浊，约半数絮状碎片沉于管底液体半混浊，约半数絮状碎片沉于管底+液体混浊，仅少数细小的絮状碎片沉于管底液体混浊，仅少数细小的絮状碎片沉于管底-表现与对照管相同表现与对照管相同l 结果判断结果判断 能与一定量的红细胞发生能与一定量的红细胞发生两个加号两个加号凝集反应的凝集反应的血清稀释度为抗体（溶血素）效价。血清稀释度为抗体（溶血素）效价。