大鼠离体肺静态顺应性的测定



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1、大鼠离体肺静态顺应性的测定 [实验目的] 学习、掌握肺顺应性的测定方法。加深理解肺顺应性和肺泡表面张力之间的关系。 [实验原理] 肺顺应性是指肺在外力作用下的可扩张性,它是衡量肺弹性阻力的一个指标。肺顺应性 与肺弹性阻力呈反向关系,弹性阻力大者扩张性小,即顺应性小;相反,弹性阻力小者则顺 应性大。肺顺应性可用单位跨肺压引起的肺容积变化来表示。因肺容量背景不同其肺顺应性 的特点不同,故以不同跨肺压所引起肺容积变化的关系曲线,即肺顺应性曲线来反映肺顺应 性或肺弹性阻力。实验在离体肺上进行,模拟分段屏气下测定肺的压力-容积变化,并绘制 成曲线。 肺弹性阻力主要来源于肺泡内表面少量液体的表面张
2、力和肺内弹性纤维的弹性回缩力, 若分析此两种作用,可向肺内充气或充水,分别测其压力-容积曲线。因为充气时肺泡内存 在气-液界面,而充水时不存在此界面,故测出的压力-容积曲线不同。 [实验对象] 大鼠。 [实验药品] 20%氨基甲酸乙酯溶液、生理盐水 [仪器与器械] 哺乳动物手术器械、肺顺应性实验装置(图 8.1-1),该装置的连接导管用一次性输液器 连接)、10 ml注射器一个(上连一个20 cm的细塑料管)、玻璃平皿一个、滴管一个、棉线。 [实验方法与步骤] 1 ■气管一肺标本制备 取大约250 g体重的大鼠,用过量氨基甲酸乙酯(5 ml・kg-1)麻醉 致死,沿前胸正中线切开
3、皮肤,在胸骨剑突下剪开腹壁并向两侧扩大创口,在肋膈角处刺破 膈肌使肺萎陷,然后向两侧剪断膈肌与胸壁的联系,再沿萎陷的肺缘剪断两侧胸壁直至锁骨, 除去剪下的胸前壁,分离剪断肺底部与膈肌联系的组织。然后,在颈部分离气管,在甲状软 骨下剪断,向下分离并剪断与之联系的组织,直到气管--肺标本全部从胸腔中游离出来,最 后剪掉附着的心脏。在整个手术过程中,所用金属器械不可与肺组织接触,以避免造成肺或 气管损伤而发生漏气。标本游离后放在一玻璃平皿内用生理盐水冲去血迹,在气管断缘处插 入一 Y 型插管,用棉线结扎牢固,至此完成标本制备。 2. 仪器连接 按照图8.1-1将肺标本连于肺顺应性测定装置3.实验
4、步骤 (1) 向肺内注入空气做压力一容积曲线 肺组织放在有少量生理盐水的玻璃平皿内,打开调节器1、2及Y型插管3的顶盖5, 将注射器抽入 l0ml 空气后,关闭顶盖 5,便可进行实验。通过螺旋推进器向检测系统中缓 慢注入空气,在水检压计稳定在0、4、8,……24cm各段水平处,分别记录各压力水平时 的注入空气容积。每一压力水平的维持都需要进一步注入少量气体,越是高水平压力 ,注入 空气越多,达到稳定所需时间也越长,一般需要4〜5 min。在压力达到2.35 kPa(24 cmHaO) 时开始抽气,按 2.35(24 cmH2O)、1.96(20)、1.57(16),……0 kPa( cmH
5、aO)各阶段依次使 检压计的压力下降,待压力稳定后记录各水平注射器内的空气容积。每一压力水平也需要进 一步抽气而得以稳定,压力越低达到稳定所需时间越长。在整个实验过程中不断向标本上滴 洒生理盐水,保持标本湿润。将所得各压力水平的空气容积,减去检压计液柱升高的容积(预 先测算好)即是进入肺内气体容积,结果记入表8.1-1 内。 (2) 向肺内注入生理盐水做压力 -容积曲线 首先将测压系统内充满水并排出空气。用针头上连有塑料管的注射器从水检压计开口处 伸人并注入清水,待水流至Y型插管4处关闭调节器1,并抽出检压计中零点以上的水,使 其液面恰在零点处。然后把装置中的注射器充满生理盐水,打开Y型插管
6、3上的顶盖5,使 管道内充满生理盐水并排出气泡,盖上顶盖。向肺内注入和抽出生理盐水,重复3〜5次, 以冲洗出气管中的分泌物和气泡,打开顶盖将冲洗液和气泡由此排出,接着关闭顶盖,然后 向平皿内倒入生理盐水深达3 cm左右,调节平台使平皿中的液面与水检压计零点同高。开 放调节器1使系统内为0 Pa,这时关闭调节器2,再将注射器内充入生理盐水10 ml连入系 统即可进行实验。与上述实验一样向肺内分阶段注入和抽出生理盐水,将每一压力水平的容 积变化记入表10.1-1内,所不同者是压力变化之阶段以98.1(1)、196.2(2)、……588. 6 Pa(6 cmH20)柱为宜,其最大容积变化最好接近上述
7、实验的最大容积水平 [注意事项] 1. 制备无损伤的气管-肺标本,是实验成败的关键。因此整个手术过程要非常细心.因肺与 周围脂肪组织颜色近似,应特别注意.若不慎造成一侧肺漏气时,可将该侧的支气管结扎,用 单侧肺进行实验,但实验时抽、注容量应减半。 2. 须用新鲜标本,整个实验中要保持肺组织的湿润.实验装置各接头处不可漏气。 3. 气或注生理盐水时速度不宜太快,量也不宜过多,一般不超过10 ml (双侧肺)。 4. 置肺的平皿要大些,以免悬浮着的肺与平皿壁接触而造成实验误差。 [可能出现的问题与解释] 1. 增加气体量时,水检压计读数不增加。 (1) 接口处漏气。 (2) 制备
8、标本时,肺泡破裂。
2. 抽、注生理盐水时水检压计波动明显,不稳定。
(1) 接口处漏气。
(2) 肺扩张不均匀。
[实验结果]
根据表 8.1-1 的数据以检压计内压力(即跨肺压)为横坐标,以各压力水平时的肺容积为
表S. 1-1 不同跨魁时肺容积变化的略记录表
跨肺压
注气
抽气
跨肺压
注水
抽水
cmHaO
ml
ml
cmHaO
ml
ml
0
0
4
1
8
2
12
3
16
4
20
5
24
&
注:1 cmH2O=98.1 Pa
纵坐标,做气体压力-肺容积曲线和水压力-肺容积曲线(参照图 8.1-2),并将两曲线加以 比较。讨论肺顺应性与肺泡表面张力的关系。
n
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