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1、我们一般采用:
花序浸染法转化拟南芥
（1） 种植：
选择吸水性好，土质松软的至石配合营养土（1:）作为拟南芥种植土壤。
直径9cm的花盆，每盆播种20-30颗。播种以后在花盆上罩上薄膜，给植 株的生长提供一个湿润的环境。
（2） 去顶：
在拟南芥初次开花时将花蕾剪掉，可以促进侧枝更多的花枝的增生。适合 转化植株的花卉并没有成熟，也没有产生已受精的角果。
（3） 配制浸染液：
在5%的蔗糖溶液中重悬农杆菌使OD=
0.8,为了保持蔗糖溶液的新鲜，可以现配现用，无需灭菌。100-200ml浸 染2-3个小盆植株，400-500ml浸染，2-3个花盆（9cm）植株。在浸染之前加入
2、 表面活性剂至浓度
0.05%（500ul/L），如果产生表面活性剂的毒性现象（浸过部分发黄或死 亡），将浓度降至
0.02%。戚老师实验室用十万分之一（50U1/L）
（4） 浸染：
将盛花期拟南芥的花表面部分浸泡在农杆菌悬浮液中2-3s，同时轻轻旋 转。
（5） 暗培养：
将浸染后植株套袋保持高度的湿润状态暗室培养24h。
（6） 浸染后培养：
隔天浇水，保证水分充足即可。
（7） 种子收集：
种子成熟，角果自然开裂后可以收种子。
（8） 转基因种子筛选：
在含有Kan抗生素的平板上培养浸染后所得种子。40mg的种子大约200颗 于含kan 10-50昭/ml的
3、0.5XMS培养基上春化2天，之后在持续光照条件下培养7-10天。根据生长 状况判断是否为转基因种子。成功转入重组质粒的种子能够在抗性培养及上正 常生长出4片以上真叶。非转基因种子不能正常生长，仅能长出2片子叶，根 的生长也受到严重抑制，一般萌发10天以后死亡。
（9） 转基因植株转土栽培。转基因种子在MS+kan平板上萌发2周以后， 将阳性植株转入土壤继续培养。
2.5转基因拟南芥纯合子筛选
由于农杆菌介导的花序浸染法只能将目标片段整合到一条DNA单链上，为 后续生理性状实验需要，将T0代转基因种子培育至T2代，利用抗性筛选得到 纯合子。根据杂合子在发生性状分离时会产生野生型后代，而野生型种子不能 在MS+Kanr（50昭/ml）平板上正常生长，进行转基因植株纯合子的筛选。
农杆菌花序侵染的方法
