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1、 v概念：用生化的方法来检测细菌对各种基质的代谢作用及代谢产物，借以鉴别细菌种类，这种生化试验称为细菌的生化反应试验。v意义：是鉴别细菌的重要依据。细菌的生化反应 生化反应 碳 水 化 合 物代 谢 试 验各 种 酶 类 试 验抑 菌 试 验 糖 发 酵 试 验甲 基 红 试 验V-P试 验蛋 白 质 和 氨 基酸 代 谢 试 验 硫 化 氢 试 验吲 哚 试 验碳 源 和 氮 源利 用 试 验 枸 橼 酸 盐 利 用 试 验 IMViC试验 甲基红试验v大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸后进行混合酸发酵，产生乳酸、甲酸、乙酸、琥珀酸等多种有机酸，使培养液pH小于4.5，甲 基 红 指 示 剂 呈
2、红 色 ， 为 甲 基 红 试 验 阳 性 。v 产 气 杆 菌 分 解 葡 萄 糖 产 生 丙 酮 酸 ， 经 脱 羧 后 生 成 中 性 乙 酰 甲基 甲 醇 ， 培 养 液 的 pH大 于 5.4， 甲 基 红 指 示 剂 呈 橘 黄 色 ， 为甲 基 红 试 验 阴 性 。原理 葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基红试剂培养基变红甲基红试验乙酰甲基甲醇（中性）pH5.4 甲基红试剂培养基橘黄色 方法滴 加 甲 基 红 指 示 剂 数 滴 ， 立 即 观 察 结 果结果红 色 为 阳 性 ， +不 出 现 红 色 为 阴 性 ， - VP试验v 产 气 杆 菌 利 用 葡 萄 糖
3、 时 产 生 中 性 物 质 之 一 就 是 乙 酰 甲 基 甲 醇 ，它 在 碱 性 溶 液 中 被 空 气 中 的 分 子 氧 氧 化 生 成 二 乙 酰 ， 二 乙 酰与 培 养 基 中 的 含 胍 基 的 化 合 物 反 应 ， 生 成 红 色 化 合 物 ， 是 VP试 验 阳 性 ； 而 大 肠 杆 菌 不 能 产 生 乙 酰 甲 基 甲 醇 ， 为 阴 性 。原理 葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰V-P试剂培养基变红VP试验与蛋白胨培养基精氨酸中的胍基反应生成红色化合物 方法取 出 试 管 培 养 物 ， 加 入 等 量 的 李 氏 试 剂 ， 摇 匀 后不 加 塞 ， 静 置 3
4、0分 钟 观 察 结 果 。 结果红 色 为 阳 性 ， +无 红 色 为 阴 性 ， - 枸橼酸盐利用试验 某 些 细 菌 能 力 利 用 培 养 基 中 的 枸 橼 酸 盐 作 为 唯 一 的 碳 源 ，也 能 利 用 其 中 的 铵 盐 作 为 唯 一 氮 源 ， 细 菌 生 长 过 程 中 分 解 枸橼 酸 盐 产 生 碳 酸 盐 和 分 解 铵 盐 生 成 的 氨 ， 使 培 养 基 变 碱 性 ，使 指 示 剂 呈 碱 性 反 应 ， 指 示 剂 由 绿 色 变 为 深 蓝 色 是 枸 橼 酸 盐利 用 试 验 阳 性 （ 产 气 杆 菌 ） ， 反 之 培 养 基 不 变 色 是 为 阴 性 （大 肠 杆 菌 ） 。原理 枸橼酸盐铵盐碳酸盐氨培养基pH下降溴麝香草酚蓝 呈碱性变色培养基变蓝培养基 枸橼酸盐利用试验原理 结果深 蓝 色 为 阳 性 + 绿 色 为 阴 性 - 谢谢观看
细菌的生化反应
