过氧化物酶的显示和观察
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1、细胞中过氧化物酶的显示与观察 电镜下的过氧化物酶体 电子致密的核心是尿酸氧化酶的结晶,即类核体 peroxisome Peroxisomes are simple, membrane-bound vesicles (or microbodies, as they are also called) A diameter of 0.1 to 1.0 m that often contain a dense, crystalline core of oxidative enzymes Peroxisomes are multifunctional organelles, containing mor
2、e than 50 enzymes involved in such diverse activitiesglyoxysome乙醛酸循环体: specialized type of peroxisome, present in plants. 过 氧 化 物 酶 体 包 括 2种 酶 类 : 氧 化 酶 (oxidases) 约 占 过 氧 化 物 酶 体 酶 总 量 的 一 半 各 种 氧 化 酶 作 用 于 不 同 的 底 物 将 氧 还 原 成 过 氧 化 氢 。 RH2 + O2 R + H2O2 过 氧 化 氢 酶 (catalase)是过氧化物酶体的标志酶 约 占 过 氧 化 物
3、酶 体 酶 总 量 的 40% 作 用 是 将 过 氧 化 氢 还 原 成 水 RH2 +H2O2 R + 2H2O 过 氧化 物酶 体的 增殖 实验原理氧化还原酶类的原位显示:根据氧化还原的原理,使无色的化合物氧化成有色的物质得以定位。过氧化物酶体系能把许多胺类氧化成有色化合物。本实验用联苯胺混合液处理标本,过氧化物酶可将其氧化为蓝色或棕色产物。根据颜色反应,可判定过氧化物酶的有无或多少。RH 2+ O2 R + H2O2H2O2 + RH2 R + H2O 实验步骤实验一:取洋葱鳞片表皮一薄片; 置于0.85NaCl溶液中35分钟。培养皿1浸在溶有0.1%钼酸胺的0.85NaCl溶液中5分
4、钟。培养皿2在使用联苯胺溶液前,每2ml加10%的过氧化氢2滴。培养皿3浸在联苯胺溶液中2分钟,至切片出现蓝色为止。培养皿3在0.85%NaCl溶液中洗1min。培养皿4将薄片置于载玻片上展开,盖上盖玻片,显微镜检查。 实验二: 取马铃薯块茎一个,用徒手切片法切取一小薄片置于载玻片上, 滴加3的过氧化氢溶液。 用煮熟的马铃薯重复上述过程,结果如何? 实验结果 1、在显微镜下可见到细胞中有一些染成蓝色或棕色的颗粒。即为过氧化物酶存在的部位。 2、 滴加了过氧化氢溶液的马铃薯组织四周出现气泡,提示植物中过氧化氢酶的存在。过氧化氢酶能使H 2O2分解,生成H 2O和O2H2O2 H2O + O2RH 2 +H 2O2 R + 2H 2O 作业绘图表示出细胞内过氧化物酶的分布。细胞中过氧化物酶的存在有何功能?
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