T细胞斑点试验

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2、单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,2020/11/30,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,2020/11/30,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,2020/11/30,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,2020/11/30,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,2020

3、/11/30,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,2020/11/30,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,2020/11/30,,*,,,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,*,,*,单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,*,,*,T细胞斑点试验,,结核感染,T,细胞斑点检测,T,细胞斑点试验（,T-SPOT,），又叫作结核感染干扰素释放试验（,

4、Interferon Gamma Release Assays,，,IGRAs,2,2020/11/30,结核的现状,,,结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据,WHO,统计，全球约有,20,亿人感染结核分枝杆菌，每年有约,200,万人死于结核。,,,我国是世界上,22,个结核病高负担国家之一，结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的,2,倍以上。,,,,,3,2020/11/30,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,,在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷的今天， 可以给临床诊断提供参考。,,基于结核抗原特异性,T,细胞向病变部位集中的特点，

5、的检测物已不局限于静脉血，支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。,,,,4,2020/11/30,T-SPOT,的意义,1:,菌阴，结核病患者的辅助诊断,,2,：肺外结合的鉴别诊断,,3,：免疫力低下,/,受抑制患者的结核诊断,/,感染筛查,,4,：儿童结核病的辅助诊断,5,2020/11/30,T-SPOT,注意事项,1:,肝素抗凝全血，常温保存,,,不得冷冻或冷藏。,,2:,采血量：三岁以下,2ML,，,3-9,岁,4ML,，,9,岁以上,6ML,，免疫力低下或白细胞低下采,6ML,（本公司一律两管）,,3:,样本必须,4,小时内送达。,,4,：输血受试者

6、或,PET-CT,受试者，两周后检测。,,5,：受试者需阅读知情同意书并填写申请单。,,6,2020/11/30,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,,,,7,2020/11/30,结核的传统诊断手段,,结核菌素皮试：,,低敏感性：,免疫力低下人群中其敏感性大大降低。,,低特异性：,与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易造成“假阳性”结果。,,细菌学检查：,常规培养：,2,月；快速培养：,1,周；,,阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。,,病理学检查：,阳性率低，对取材标本有较高要求，有创伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。,,,,,,,,8,2020/11/30,基于,T,淋巴

7、细胞检测结核感染的原理,,结核感染的免疫应答反应以,细胞免疫,为主，结核感染后体内长期存在,抗原特异性的记忆性,T,细胞,,当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放,r,干扰素,,r,干扰素,是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要的细胞因子,,,9,2020/11/30,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,,技术：,,利用结核杆菌感染者,外周血单个核细胞（,PBMC,）,中存在,结核特异性,T,细胞,，这些淋巴细胞在受到,结核特异,,抗原刺激,后,分泌,r,干扰素,而设计的,T,细胞免疫斑点试验。,,检测外周血中受,结核特异抗原刺激,释放,r,干扰素,的,T,淋巴细胞,，经酶联免疫显

8、色后，通过,ELISPOT,分析系统,,对斑点进行计数，,1,个斑点代表一个细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。,,,,,,10,2020/11/30,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,,空白对照孔内斑点数小于,10,且阳性对照孔内斑点数大于,20,时视为试验有效,,,试验结果用每,10,6,PBMCs,中斑点形成细胞（,SFCs,）的数目来描述，即,SFCs/10,6,PBMCs,,,,11,2020/11/30,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,,,,包,12,2020/11/30,基于,T,淋巴细胞检测结核感染的原理,,,,13,2020/11/30,的临床意义,,高灵敏度,,,,,,,,,14,2020/11/30,提 问,出报告时间：一、三、五检测三个工作日出。,,标本类型：肝素抗凝全血两管,,需注意,:4,小时内送检，,8,小时内完成检测,,价格：,660,元,,方法学：酶联免疫斑点法,,英文：,T-SPOT,15,2020/11/30,Thank You !,16,2020/11/30,