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1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,实验二流感病毒的收获及,血凝效价测定,第一部分流感病毒的收获,实验目的,掌握从鸡胚尿囊腔收获流感病,毒的方法,获得大量的病毒抗原。,实验原理,BUDDING,将流感病毒接,种于鸡胚尿囊腔后,病毒就在尿囊的内,胚层细胞繁殖,繁,AtTACHMENT,FUSION,殖12天后,病毒颗,粒释放至尿囊液中,NDOCYTOSIS,从而使尿囊腔中含,有大量病毒,通过收获尿囊液,可以得到较大量的流感病毒,实验材料及器械,已接种流感病毒的十日龄鸡胚,2.无菌镊子、眼科剪刀、玻璃吸管,无菌EP管(1.5和10mL各一个,
2、3.75%酒精棉球,实验方法与步骤,收获时间根据不同的病毒而异,流感病,毒一般培养3648小时即可进行收获,收获前一天晚上,将鸡胚于4冰箱过,夜(如果急于收获亦可于-20放置1,小时左右),将鸡胚冻死,使红血球凝,固,这样可避免在收获时流出的血细胞,同尿液或羊水里的病毒发生凝集,造成,病毒滴度的下降。,4冷藏时间不宜过长,过长易造成散,黄,影响收获。快速冷冻时间也不易过,长,一旦鸡胚冻成冰块就无法收获,2.经过冰冻的鸡胚用碘酒、75%酒精消毒,鸡胚气室部卵壳,3.用无菌镊子将消毒,过的壳打碎,轻轻揭,去气室部位卵壳,撕,去壳膜和绒毛尿囊膜,并将鸡胚轻轻推向,5 DAYS,压住。,用无菌吸管通过绒,毛尿囊膜进入尿囊腔,吸出尿囊液(无大血,管处轻轻吸取清亮的,s黄色液体)。收取的,10口,尿囊液可无菌小瓶,第二部分血细胞凝集实验测定,流感病毒效价,实验目的,掌握血凝试验的方法和原理,了解流,感病毒具有凝集鸡红细胞的能力,掌握,病毒类型的测定的一种方法,Influenza a virus A membrane virus,(-)RNAS,8 different ones,汇管,micrometers,
病毒学实验第三次课流感病毒的收获及血凝效价测定课件
