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1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,ppt课件,*,紫外,-,可见光吸收实验,材料科学与工程学院,材料物理系,2014.12.19,1,ppt课件,紫外-可见光吸收实验材料科学与工程学院1ppt课件,1.,实验目的,2.,实验原理,3.,实验内容与步骤,4.,实验报告要求,5.,思考题,2,ppt课件,1.实验目的2.实验原理3.实验内容与步骤4.实验报告要求5,实验目的,1.,学习紫外,-,可见分光光度计的使用。,2.,掌握紫外,-,可见分光光度计的基本构造。,3.,使用紫外,-,可见分光光度计对样品的成分进行鉴定。,3,ppt课件,实验目的1
2、.学习紫外-可见分光光度计的使用。3ppt课件,实验原理,1.,紫外,-,可见光谱的基本原理,紫外,-,可见光谱（,ultraviolet-visible spectroscopy,，,UV-Vis,），也可简称紫外光谱（,UV,），是吸收光谱的一种。,紫外光谱与电子跃迁有关，分子中价电子经紫外或可见光照射时，电子从低能级跃迁到高能级，此时电子就吸收了相应波长的光，这样产生的吸收光谱即为紫外光谱。,紫外吸收光谱的波长范围是,100-400nm,，其中：,100-200nm,为远紫外区；,200-400nm,为近紫外区。,通常紫外光谱是指近紫外区，可见区为,400-800nm,。,4,ppt课件
3、,实验原理1.紫外-可见光谱的基本原理4ppt课件,图,1,电子能级与电子跃迁,由于紫外光谱是指近紫外区,(200-400 nm),，所以只能观察,*,和,n,*,跃迁，也就是说紫外光谱只适用于分析分子中具有不饱和结构的化合物。,5,ppt课件,图1 电子能级与电子跃迁 由于紫外光谱是指近紫,2.,紫外光谱的表示法,（,1,）紫外吸收带的强度,一定温度下，一定波长的单色光通过均匀的、非散射的溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。,朗伯,-,比尔定律（,Lamber-Beer,）：,A,kbc,A,：吸光度（描述溶液对光的吸收程度）；,k,：摩尔吸光系数，单位,Lmol,-1,
4、cm,-1,；,b,：液层厚度（光程长度），通常以,cm,为单位；,c,：溶液的摩尔浓度，单位,molL,-1,；,入射光,I,0,透射光,I,t,6,ppt课件,2.紫外光谱的表示法入射光 I0透射光 It6ppt课件,（,2,）紫外光谱的表示法,UV,图由横坐标、纵坐标和吸收曲线组成。,横坐标表示吸收光的波长，用,nm,为单位。,纵坐标表示吸收光的吸收强度，可以用,A,（吸光度）、,T,（透射比或透光率或透过率）、,1-T,（吸收率）、,k,（吸收系数）中的任何一个来表示。,T=I,t,/I,0,吸收曲线表示化合物的紫外吸收情况。曲线最大吸收峰的横坐标为该吸收峰的位置，纵坐标为它的吸收强度
5、。,7,ppt课件,（2）紫外光谱的表示法7ppt课件,（,3,）紫外,-,可见分光光度计的基本构造,基本构造主要由,光源,、,单色器,、,吸收池,、,检测器,和,信号显示系统,五大部分组成。,光源 单色器 样品池 检测器 信号显示系统,8,ppt课件,（3）紫外-可见分光光度计的基本构造 光源,光源,在整个紫外光区或可见光区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。,紫外光源,-,氘灯,(18-360nm),可见光源,-,钨灯,(350-1000nm),9,ppt课件,光源紫外光源-氘灯(18-360nm)可见光源-,单色器,单色器是将光源辐射的复合光分成单色光的光
6、学装置。它是分光光度计的心脏部分。单色器一般由,狭缝,、,色散元件,及,透镜系统,组成。关键是色散元件，最常见的色散元件是棱镜和光栅。,狭缝：将单色器的散射光切割成单色光。直接关系到仪器的分辨 率。狭缝越小，光的单色性越好。分为入射狭缝和出射狭缝。,棱镜：玻璃,350,3200nm,，石英,185,4000nm,。,光栅：波长范围宽，色散均匀，分辨性能好，使用方便。,10,ppt课件,单色器10ppt课件,吸收池,又称比色皿，用于盛放待测溶液和决定透光液层厚度的器件。吸收材料必须能够透过所测光谱范围的光；一般,可见光区使用玻璃吸收池,，,紫外光区使用石英吸收池,；规格有,0.5,、,1.0,、
7、,2.0,、,5.0cm,等。,在高精度的分析测定中（紫外区尤其重要），吸收池要挑选配对，因为吸收池材料的本身吸光特性以及吸收池的光程长度的精度等对分析结果都有影响。,注意事项：,手执两侧的毛面，盛放液体高度四分之三。,11,ppt课件,吸收池11ppt课件,检测器,利用,光电效应,将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电管、光电倍增管、光电二极管、光电摄像管等。,要求灵敏度高、响应时间短、噪声水平低、稳定性好的优点。,光电池,光电管 光电倍增管,12,ppt课件,检测器光电池 光电管,信号显示系统,将监测器输出的信号放大并显示出来的装置。,常用的液晶数字指示窗口和计算控制显示。,以
8、检流计或微安表指示仪表,数字显示和自动记录型装置,13,ppt课件,信号显示系统以检流计或微安表指示仪表13ppt课件,（,4,）紫外,-,可见分光光度计的分类,按仪器使用波长分类：,真空紫外分光光度计（,0.1-200 nm,）；,可见分光光度计（,350-700 nm,）；,紫外,-,可见分光光度计（,190-1100 nm,）；,紫外,-,可见,-,红外分光光度计（,190-2500 nm,）；,按仪器使用的光学系统分类：,单光束分光光度计；,双光束分光光度计；,双波长分光光度计；,动力学分光光度计；,14,ppt课件,（4）紫外-可见分光光度计的分类14ppt课件,单光束,分光光度计,
9、双光束,分光光度计,双波长,分光光度计,15,ppt课件,单光束分光光度计双光束分光光度计双波长分光光度计15ppt课,（,5,）紫外,-,可见分光光度计的应用,推断官能团,如果一个化合物在紫外区有强的吸收，表明它可能存在共轭体系，吸收波长越长，共轭体系越大。,判断异构体,不同的异构体可能具有不同的紫外光谱，以此来判断属哪个异构体。,推断分子结构,（骨架）（可结合,Woodward,规则的计算结果）,分子量的测定,定量分析的应用,：朗伯,-,比尔定律。,医药研究,抗癌药物对,DNA,变性影响的研究、人血清与癌细胞关系的研究。,16,ppt课件,（5）紫外-可见分光光度计的应用16ppt课件,实
10、验内容与步骤,（一）样品溶液的配制,1.,取本品,10,片，精密称定，研细，再精密称取,0.4g,（约醋酸地塞米松,7.5mg,），置于,50ml,的容量瓶中，加入乙醇,35ml,，超声溶解,20,分钟左右，放冷至室温；,2.,加入乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液,10ml,，置于另一个,50ml,的容量瓶中，加入乙醇稀释至刻度，摇匀，待用。,17,ppt课件,实验内容与步骤（一）样品溶液的配制17ppt课件,式（,2,）中：,A,为样品吸光度；,W,为平均片重（,g/,片）；,M,为称样重量（,g,）；,标示量为,0.75mg/,片；,E,1%1cm,为醋酸地塞米松（,C,24,H
11、,31,FO,6,）的吸收系数，按,354,计算。,（二）样品的测定,1.,依次打开电脑电源，分光光度计电源，在桌面上双击,UV-Probe,图表，输入密码；,2.,等待仪器自检查，所有自检项目完成通过后，点击“确定”，再点击“基线”，进行基线校正；,3.,将样品池和参比池均放上空白，点击“自动调零”。,4.,将样品池换上样品，选择“编辑”中的“方法”，建立数据采集的方法；,5.,然后再在,200nm-400nm,范围内扫描，确定最大吸收波长，保存数据；,6.,再在最大吸收波长范围附近确定吸收波长范围，扫描测定其吸光度，保存数据；,7.,打印图表，关闭仪器电源。,8.,按吸收系数法计算本品的含
12、量，计算公式如下：,18,ppt课件,式（2）中：（二）样品的测定18ppt课件,实验报告要求,明确实验目及要求；,掌握,实验原理、仪器结构；,简述,主要实验步骤；,测试结果曲线及分析；,回答思考题。,19,ppt课件,实验报告要求明确实验目及要求；19ppt课件,思考题,1.,紫外可见分光光度计主要有哪些组成部件，各有什么作用？,2.,本实验的主要操作步骤是什么？有什么注意事项？,20,ppt课件,思考题1.紫外可见分光光度计主要有哪些组成部件，各有什么作用,分组安排：,21,ppt课件,分组安排：21ppt课件,谢 谢！,材料科学与工程学院,材料物理系,2014.12.19,22,ppt课件,谢 谢！材料科学与工程学院22ppt课件,
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