月季的花药培养专业专家讲座

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1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,月季花药培养,月季的花药培养专业专家讲座,第1页,花中皇后月季又称“月月红”，,自然花期,5至11月,，开花连续不停，,通常扦插就能够成活,。,月季的花药培养专业专家讲座,第2页,课题背景,利用植物组织培养技术能够实现,优良品种快速繁殖，保持遗传性状一致,。但这种方法同时也存在着一定缺点繁殖出来新植株往往无法取得一些新性状。,1964年，印度科学家在培养毛叶曼陀罗,花药,时，首次取得了由花药中花粉粒发育而来单倍体植株，这个,试验说明,生殖细胞,和,体细胞,一样，在离体条件下也含有发育成完整植株潜能。,单倍体

2、育种不但,缩短了育种周期,，也为新品种培育开辟了新路径。,月季的花药培养专业专家讲座,第3页,知识回顾:,单倍体育种过程？,花药离体培养（,N）,单倍体植株（,N）,秋水仙素处理，使染色体翻倍,植株（,2N）,特点：,1.显著缩短育种年限,2.后代植株都为纯合子。,正常植株（,2N）,月季的花药培养专业专家讲座,第4页,观察P37图36，和减数分裂比较，你能指出对应时期吗？又有何特点？,阅读“被子植物花粉发育”，思索以下问题：,被子植物花结构是怎样？,被子植物花粉发育要经历哪些阶段？,一、基础知识,月季的花药培养专业专家讲座,第5页,（一）被子植物花粉发育,花丝,花药：,囊状结构，内有很多花粉

3、,1.雄蕊,雄蕊,雌蕊,月季的花药培养专业专家讲座,第6页,2.花粉概念:由,花粉母细胞,经过,减数分裂,形成,单倍体生殖细胞,.,月季的花药培养专业专家讲座,第7页,3.花粉发育过程,减数分裂,有丝分裂,月季的花药培养专业专家讲座,第8页,花粉粒形成,花粉母细胞,（小孢子母细胞）,减数分裂,（四分体时期）,进入,单核期,有丝,分裂,（单核居中期）,4个小孢子,1个小孢子,（单核靠边期）,1个小孢子,花粉管细胞核,生殖细胞核,双核期,花粉粒,营养细胞,生殖细胞,有丝,分裂,精子,精子,月季的花药培养专业专家讲座,第9页,花粉是,经过,分裂而形成，所以，花粉是,倍体_,细胞,经历时期：,时期、,

4、期、,期,小孢子母细胞,减数,单,生殖,小孢子四分体,单核,双核,月季的花药培养专业专家讲座,第10页,知识拓展,被子植物花粉发育过程中四分体时期是指4个单倍体细胞连在一起时期；,减数分裂过程中四分体时期是指同源染色体配对后，一对同源染色体含有四条染色单体阶段。,被子植物花粉发育过程中四分体时期与减数分裂过程中四分体时期含义,月季的花药培养专业专家讲座,第11页,在正常情况下，一个小孢子母细胞能够产生,个精子；在一枚花药中能够产 生,个花粉。,8,许多,营养细胞,在花粉萌发过程中作用：,控制花粉萌发并提供营养,两个精子和一个营养核基因型,。,相同,注意：,月季的花药培养专业专家讲座,第12页,

5、A.花粉是花粉母细胞经有丝分裂形成,B.花粉发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段,C.花粉发育经历四分体时期与减数分裂四分体时期含义相同,D.花粉母细胞形成花粉粒中精子过程是一系列减数分裂过程,1.以下关于被子植物花粉形成，说法正确是,B,月季的花药培养专业专家讲座,第13页,（二）产生花粉植株两种路径,阅读P38教材内容，说出产生花粉植株两种路径及原因,1.产生花粉植株两条路径,2.产生花粉植株含有两条路径,原因,：,花粉,花粉,从芽,从芽,移栽,脱分化,诱导,胚状体,愈伤组织,分化,再分化,生根,主要取决于培养基中,种类及其,配比。,激素,浓度,月季的花药培养专业专家讲座,第1

6、4页,体细胞胚（胚状体）：,在组织培养过程中，一些体细胞在形态上转变为与合子发育成胚非常相同结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为,体细胞胚（胚状体）,。,月季的花药培养专业专家讲座,第15页,（三）影响花药培养原因,阅读教材P3839页，找出哪些原因能够影响花药培养？,1、材料选择,不一样种类植物诱导成功率不一样。,同一个植物，亲本植株生理情况对诱导成功率有直接影响。,适当花粉发育时期,：花期早期时花药最正确。,选择最适当花粉发育时期,月季的花药培养专业专家讲座,第16页,为何不选择使用单核期之前或之后花药接种？,单核期之前花药，质地幼嫩，极易破碎。,单核期之后花药，花瓣已经有些松动，又给材料

7、消毒带来困难。,想一想,月季的花药培养专业专家讲座,第17页,为何花瓣松动会给材料消毒带来困难？,答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料消毒带来困难。,为何花瓣松动会给材料消毒带来困难？,讨论：,月季的花药培养专业专家讲座,第18页,花药培养所采取培养基各成份中植物生长调整剂水平和配比起决定作用。,诱导愈伤组织或胚状体产生培养基：广泛使用 2，4-D、IAA；,诱导分化培养基常除去2，4-D而以IBA代之。,2.培养基组成：,月季的花药培养专业专家讲座,第19页,亲本植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等对诱导成功率都有一定影响。,3.其它原因：,月季的花药培养专业专家讲座,第20页

8、,2.在月季花药培养成单倍体植株过程中，选择哪个时期最易成活（）,A.单核期前花药,B.单核期后花药,C.单核期花药,D.双核期,C,月季的花药培养专业专家讲座,第21页,3.月季花药培养时花粉粒最好是（）,A、四分体时期 B、单核居中期,C、单核靠边期 D、二核或三核花粉粒,C,月季的花药培养专业专家讲座,第22页,材料选取,试验操作流程包含：,（一）_,；,（二）,_；,（三）_。,材料消毒,接种和培养,二、实验操作,月季的花药培养专业专家讲座,第23页,1选择花药时普通经过_确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最惯用染色剂是_和_，它们分别能够将细胞核染成,_色和_色。,（一

9、）材料选取,焙花青-铬矾,阅读“（一）材料选取”，回答以下问题：,镜检,醋酸洋红,蓝黑,红,月季的花药培养专业专家讲座,第24页,（二）材料消毒,阅读“（二）材料消毒”，填写以下流程图：,花蕾,（,_,）,清洗,吸干水分,消毒24min,冲洗35次,浸泡约30s,（,_,）,（,_,）,（,_,）,（,_,）,70%酒精,无菌吸水纸,无菌水,无菌水,1%氯化汞溶液,1%次氯酸钙溶液,饱和漂白粉溶液,1%氯化汞溶液,说明：,用于培养花药，实际上多数未熟，因为它外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。,月季的花药培养专业专家讲座,第25页,（三）接种和培养,

10、阅读“（三）,接种和培养,”，,回答以下问题：,1.培养：温度为_,，幼苗形成之前,（需要、不需要）光照。,25,2.经过愈伤组织形成植株，经常会出现,_改变，因而需要判定和筛选。,染色体组数目,月季的花药培养专业专家讲座,第26页,为何经过愈伤组织形成植株会发生染色体倍性改变？,主要原因是营养核和生殖核融合造成,。,想一想,月季的花药培养专业专家讲座,第27页,4.关于花药培养产生花粉植株路径，以下叙述错误是,(,),A,花粉可经过愈伤组织发育成植株,B,花粉可经过胚状体深入分化成植株,C,主要由培养基中激素种类及用量决定路径,D,产生胚状体是花药离体培养中特有路径,D,月季的花药培养专业专

11、家讲座,第28页,5.关于月季花药培养技术与菊花组织培养技术不一样，以下说法不正确是(),A花药培养需发育时期适宜花蕾,B花药培养对培养基配方要求更为严格,C培养基配制方法完全不一样,D花药裂开后长出愈伤组织或释放胚状体要及时换培养基,C,月季的花药培养专业专家讲座,第29页,6.,下面是被子植物花粉发育过程简略表示，请回答：,小孢子母细胞,双核期,(1),是指,_,时期，由小孢子母细胞经,_,分裂形成。,(2),和,分别是指,_,期和,_,期，该期细胞特点是,_,。,(3)1,个花粉母细胞经过分裂最多能形成,_,个花粉粒，,_,个细胞核。,(4)双核期两个核分别叫_核和_核。,(5)在进行花

12、药组织培养时选择_段培养成功率最高。,四分体,减数,单核居中,单核靠边,含浓厚原生质,4,12,生殖细胞,花粉管细胞,月季的花药培养专业专家讲座,第30页,7.将基因型为AaBb小麦花粉细胞经过无菌操作接入含有全部营养成份培养基试管中，在一定条件下诱导形成试管幼苗，其过程如图：,小麦花粉细胞愈伤组织丛芽生根植株,（1）发育成植株称为_，基因型有_。,（2）小麦形成花粉细胞分裂方式是_，花粉发育成植物体过程中细胞分裂方式是_。,（3）若得到可育植株，需要用_对_（填符号）进行处理，所取得植株基因型可能是_。,单倍体,AB、Ab、aB、ab,月季的花药培养专业专家讲座,第31页,答案：,（1）单倍

13、体AB、Ab、aB、ab,（2）减数分裂和有丝分裂有丝分裂,（3）秋水仙素AABB、AAbb、aaBB、aabb,（4）A、B、D,月季的花药培养专业专家讲座,第32页,8、基因型为AaBb水稻（条染色体）花药经过无菌操作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。,（）愈伤组织是花粉细胞分裂形成不规则细胞团，愈伤组织必须从培养基中取得（）（）和小分子有机物等营养物质。,（）要促进花粉细胞分裂分化，培养基中应有（）（）两种激素。,愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，由芽发育成叶茎。这一过程必须给予光照，其原因是（）利用光能制造有机物促进试管苗生长发育。,（）试管苗细胞核中有（）条脱氧核苷酸链。试管

14、苗基因型有：,水,无机盐,生长素,细胞分裂素,叶,24,AB Ab aB ab,月季的花药培养专业专家讲座,第33页,植物组织培养技术与花药培养技术,异同点,项目,相同点,不一样点,植物组织培养技术,离体植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。,外植体为体细胞，染色体数,无,需加倍。,花药培养技术,取材为花药，培养为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株染色体数，而且为纯种。,月季的花药培养专业专家讲座,第34页,9.草莓生产上传统繁殖方式易将所感染病毒传输给后代，造成产量降低。品质变差。利用微型繁殖技术能够培育出无病毒幼苗。

15、草 莓微型繁殖基本过程以下：,外植体 愈伤组织 芽、根 植株,请回答：,（1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时，普通选取_ 作为外植体，其依据是_,_,。,（2）在过程中，惯用MS培养基主要成份包含大量元素、微量元素和_，在配制好培养基中，经常需要添加_，有利于外植体开启细胞分裂形成愈伤组织。接种后25d，若发觉外植体边缘局部污染，原因可能是_,。,（3）在过程中，愈伤组织在诱导生根培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是_ 。,茎尖、根尖,茎尖、根尖不含病毒,有机物,植物激素,外植体消毒不彻底,培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量比值偏低,月季的花药培养专业专家讲座,第35页,教材P40练习1.,F2代紫色甜玉米基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。假如利用常规育种方法，将F2代中紫色甜玉米与白色甜玉米（aasusu）进行测交，能够选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐，耗时也较长，需要最少三年选种和育种时间。,假如利用花药培养技术，在F1代产生花粉中就可能有Asu组合，再将花粉植株进行染色体加倍，就能够直接得到紫色甜玉米纯合体（AAsusu）。这种方法能够大大缩短育种周期。,月季的花药培养专业专家讲座,第36页,