人胰岛素的制备

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1、人胰岛素的制备 I转化与扩增 20 / 21 基因工程基本流程示意注 an 皿 ana □oo Q 一、 获得目的基因 从供体细胞中提取mRNA,以其为模板，在反转录酶的作用下，反 转录合成胰岛素mRNA互补DNA,再以cDNA第一链为模板，在反转录 酶或DNA聚合酶I的作用在，最终合成编码它的双链DNA序列。即得到 了目的基因。 反转录-聚合酶链反应法 （一）从人体细胞内提取胰岛素基因转录的mRNA 1,细胞总RNA的提取： 取胰岛B细胞，用P

2、BS洗后，加入TRIZOL试将细胞破裂，后用 DEPC处理，多次离心后，取RNA白色沉淀，测OD值，电泳。 2 ,从总RNA中分离mRNA： 取上述提取的总RNA若干，加入Buffer OBB , Oligotex Suspension ,打匀。7（TC水浴（裂解RNA的二级结构），20-30℃ 条件下,静置（让Oligotex与mRNA结合）。将Oligotex/mRNA复合 物的沉淀加到EP管SPIN柱上高速离心，加Buffer将其他RNA洗脱， 最后用琼脂糖凝胶电泳纯化mRNA。 （二）mRNA转录合成cDNA第一链 cone第一链的合成 加入上步获得的mRNA和适当引物于EP

3、管中，加入RNase-free water,混匀后,70七反应10分钟，反应完成后，立刻将反应体系置于冰上 5min;稍微离心一下，顺序加入缓冲液、RNA酶抑制剂、反转录酶、dNTP （加入放射性同位素利于检验），混匀，稍微离心反应物之后,42（放置 2分钟。取出置于冰上。电泳分析，同位素活性测定。 （三）PCR法扩增，特异合成目的cDNA链 通过胰岛素的特异引物，用PCR法进行扩增，特异的合成胰岛素 的cDNA链。 PCR法的操作步骤： 预变性 引物退火 引物延伸 循环25-35次 最后延伸 ⑥前端引物: ⑥ 5' -ggt tcc gga tct ggt tct ggt

4、 tct ctg gtc ccc cgc ggt agt cac cac cac cac cac cac cgt ttt gtg aac caa cac ctg tgc ggc-3' ⑥后端引物： ⑥ 5' -agt gtc gac tta gtt gca gta gtt etc cag ctg gta-3' 二、组建重组质粒 采用pQE—30质粒作为载体，用双酶切法进行基因重组。 1 ,双醯切法 用两种酶限制性内切核酸酸消化载体DNA和外源DNA片段,使载体 和外源目的基因的两端分别形成不同黏性末端，将它们混合，在连接酶的 作用下相同的黏性末端可退火连接成重组DNA分子，从而实现

5、DNA的定 向连接。 2 ,重组过程 PQE-30用Hind III和BainH I酶切，琼脂糖凝胶电泳分离、回收 纯化酶切片段。外源DNA片段同样也用Hind III和BamH I酶切并回收 纯化酶切片段。双酶切后的载体外源DNA片段混合退火，因为Hind HI 和BamH I的黏性末端不匹配,避免了载体和外源DNA片段的自身连接, 外源DNA片段只能定向地连接到载体的Hind III和BamH I位点之间。 当然也不可避免发生载体的Hind III和BamH I的黏性末端之间的两个 碱基互补形成开环，转到大肠杆菌中被修复，但这样的重组子占少数，是 低效转化。 三、构建基因工程菌 （

6、一） 重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建 A链和B链同时表达法 将人胰岛素的A链和B链编码序列拼接在一起，然后组装在大肠杆菌 -半乳糖昔酶基因的下游。重组子表达出的融合蛋白经CNBr处理后，分 离纯化A-B链多肽，然后再根据两条链连接处的氨基酸残基性质，采用 相应的裂解方法获得A链和B链肽段，最终通过体外化学折叠制备具有活 性的重组人胰岛素。重组DNA的转化 1, CaC12法制备大肠杆菌感受态细胞： 取100 ml菌体培养至（DD600 = 0.5,离心收集菌体，用10 ml冰 冷的10 mM CaC12溶液悬浮菌体，离心，收集菌体，用1 ml冰冷的 75 mMeaC12溶液悬浮菌体

7、,冰浴放置12-24小时，备用。 2,大肠杆菌感受态细胞的质粒转化： 取100 ml感受态细胞，加入相当于50 ng载体的重组，DNA连接 液，混匀。冰浴放置半小时。在42 I保温2分钟（热脉冲），快速将 转化细胞转移至冰浴中放置1 - 2分钟。加入1 ml新鲜培养基，于 37七培养1小时（扩增）。涂在合适的固体培养基平板上进行筛选。 经典的CaC12转化方法： a将培养液转入离心管中，冰上放置10分钟,然后于41下3000g离 心10分钟。 b弃去上清，用预冷的0.05mol/L的CaC12溶液10ml轻轻悬浮细 胞，冰上放置15-30分钟后,49下3000g离心10分钟。 c弃

8、去上清，加入4ml预冷含15%甘油的0.05mol/L的CaC12溶液, 轻轻悬浮细胞，冰上放置几分钟，即成感受态细胞悬液。 d感受态细胞分装成200口1的小份，贮存于-709。 e从-7CTC冰箱中取200可感受态细胞悬液，室温下使其解冻,解冻后立即置 冰上。 f加入pBS质粒DNA溶液（含量不超过50ng,体积不超过10凰,轻轻 摇匀，冰上放置30分钟后。 g42，C水浴中热击90秒或37C水浴5分钟，热击后迅速置于冰上冷 却3-5分钟。 h向管中加入1ml LB液体培养基（不含Amp）,混匀后37C振荡培养 1小时，使细菌恢复正常生长状态，并表达质粒编码的抗生素抗性基因 （Ai

9、npr ） o i将上述菌液摇匀后取100Ml涂布于含Amp的筛选平板上，正面向上 放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿,37七培养16-24小 时。 （二）重组子的筛选和鉴定（载体遗传标记检测） 1 .初筛选 随机挑取转化单菌落，在LB/AK培养基（含100p g/ml氨节青霉素和 50ug/ml卡那霉素）中进行培养，用O.5mmol/LIPTG诱导表达。 表达情况用16. 5%SDS. PAGE进行分析。 2 .重组菌的后续鉴定 直接电泳检测法 将初筛选获得的重组菌扩大培养后，提取其质粒DNA,通过PCR对其进 行扩增，利用有插入片段的重组载体的分子量比野生型载体

10、分子量大，用 电泳法检测质粒是否为重组质粒。 目的蛋白表达检验 所得菌体经溶菌酶/超声破碎细胞后得到的包涵体进行SDS-PAGE分 析，所需基因工程菌表达的外源蛋(His)6 • Arg-Arg-人胰岛素原以包涵体 形式存在，其分子大小约为13kb,经电泳与胰岛素原marker对比，如 条带显示有所需目的蛋白，则所得菌既可做工程菌使用，经扩大培养后， 斜面保存以便后续使用。 3 .工程菌的保藏 15%甘油保存菌种，菌液=20:80,,充分混匀后,-70度保藏。 四、培养工程菌 优化发酵条件 采用比浊法测定不同时间培养基中菌量， 绘制基因工程菌的生长曲线，在摇瓶培 养的水平下，

11、采用优化的发酵培养基发酵基因工菌，培养4小时候即进入 对数生长期，而且对数生长期可延长至17小时。 1,正交优化实验： 采用正交法，选取摇瓶培养条件中七个主要因素进行两水平正交优 化，该七个因素为：种子活化方式，摇床转递（通风量），IPTG诱导温度， 接种量，IPTG添加量，诱导时间，补料方式。分别用A、B、C、D、E、 F、G表示,以每升培养基收获湿菌体的量与发酵液的A600为目标量， 考察条件优化的效果，进行八次实验，对实验结果进行分析，优化出最佳 实验条件。 2,其他条件优化： 在优化发酵条件的基础上，进一步就各种金属元素对苗体生长发重 组蛋白诱导的影响作了分析。 3,放大培

12、养（比较不同发酵工艺产： 在优化摇瓶水平发酵试验的基础上，放大至1 L培养基中比较两种 发酵工艺。在不同转速，通气量，pH条件下，比较选择产量最高的发酵 工艺。 五、产物分离纯化 由于基因工程药物是从转化细胞、而不是从正常细胞生产的，所以 对产品的纯度要求也要高于传统产品。 基因工程药物的分离纯化一般不应超过4-5个步骤，包括细胞破碎、固液 分离、浓缩与初步纯化、高度纯化直至得到纯品以与成品加工。 发酵液进行细胞分离，分别得到胞内产物和胞外产物。 胞外产物直接进行透析浓缩然后进行再复性与酶转化，再对产物进 行高度纯化，最后制剂即可。 胞内产物用溶酶菌或超声波将细胞破碎，细胞破碎

13、后用高速离心法 进行固液分离。分离后用变性剂或者离子去污剂得到包含体，再用变性剂 （尿素）使其变形，接着用二次复性法将其复性。对复性后的产物进行透 析浓缩，然后进行再复性与酶转化，再对产物进行高度纯化，最后制剂即 可。 重组蛋白分离纯化的特点 重组蛋白质分离纯化的特点为：（1）大多数重组蛋白质产品是生物活性 物质，在分离纯化过程中，有机溶剂、溶液pH值、离子强度的变化均可 使蛋白质变性失活a（2）重组蛋白质产品在物料中含量很低，凰物料组成非 常复杂。例如，利用基因工襁菌发酵生产蛋白藤，物料中含有大量缀成复 杂的培养基、荣体生产代谢物等，疆拣蛋鑫襄魏含量嚣豢不瑟蛋鑫凄慈爨 鹃1%。舂些嚣拣鬣

14、囊矮存在予缀懿武或在胞内形成包含体，为获敬蛋白 质，还需避行细脆破碎，结鬟物料中含有大量的细胞碎片和胞内产物。（3） 含蛋白质产晶的物料不稳定，蛋白质产品易受料液中蛋自水解酶降解。（4） 很多熏组蛋白质产品作为医药、食品被人炎利用，因而要求蛋国螺产器必 绥是裹潢缝钠瓣，产蘸无萤、兹致热源等。与传统麓生物大分子分离方式 楣镣，嘤缀蛋臼的分离纯纯恣憨秘用其携理稻化学性质的差异，即以分子 的大小、形状、溶解度、等电点、祭疏水性以与与其它分子的亲和性等性 质建立起来的。 二次复性法： 0. 5g包涵体溶解于一定量的缓冲液B(50mmol/LGly—NaOH, 8 moi/L尿素，B_琉基乙醇，p

15、H 9. 5)中，使之充分混悬，静置1小时 以上。混悬液分步逐滴加入到缓冲液C(50mmol/LGly-NaOH,半胱氨 酸一胱氨酸，pH 9. 5)中，49静置复性过夜。上样于巳用50mmol/LGly —NaOH(pH9. 5)平衡的 DEAE-Sepharose FF 柱，用 0. Imol/L 的 氯化钠梯度洗脱，通过SDS-PAGE确定RRhPI位置，用 DEAE-Sepharose FF做离子交换层析，收集含RRhPI的洗脱峰2,层 析图谱见(图6)。电泳检测显示(图11)峰2主要为RRhPI,与少量高分 子杂质，收集峰2做再复性。峰1为pH高于9.5与一些疏水性蛋白质 形成的穿透

16、峰，绝大部分pH低于RRhPI的蛋白质和核酸类杂质则牢固 地结合在柱子上，在较高盐浓度与2mol/L NaCl的条件下被洗脱下来， 形成其他峰3和峰4。胰岛素原(RRhPI)的再复性与酶切转化： 1,复性 将初步复性与纯化后的RRhPI通过透析浓缩，先后转换到缓冲液B 和D(50mmol/L Gly-NaOH,氧化型谷胱甘肽(GSSG)—还原型谷胱甘 (GSH)pH9. 5)中，使蛋白浓度为0. 1~0. 6 mg/ml, 4寸静置过夜。 2廨切 复性后的RRhPI复性液调节pH后加入一定量的胰蛋白酶(trypsin) 和竣肽酶B(carboxypeptidase B)在37。C进行

17、协同酶切一段时间，然 后滴加2 moi/LZnCI:至ZnCl:浓度为0. Imol/L终止反应并沉淀 生成的 hl,用双蒸水洗涤沉淀得较纯B9重组人胰岛素约79 mg/L培养基。 重组胰岛素粗品的纯化： 胰岛素粗品用0. 2 mol/L NaAc - HAc, pH4. 0溶解。溶解后的样品 通过 Superdex 75进行纯化（图10）,得1、2、3峰，收集峰3,透析后冻干 即 为胰岛素产品所得胰岛素产品用SDS-PAGE分析为单带，电泳检测见图。 2 kfl ▲ 10 9 20.1 kO ,4 40 一 一 1 2 3-4567 图11.SDS-聚丙埃酰联电泳检测

18、图 1 ,低分子量标准：2.人胰岛素标准品；3.人胰岛素制品 4.二次复性法中通过DEAE«Sepharose FF纯化的RRhPI 六、除菌过滤 传统过滤只能滤去空气中的尘埃、液体中的异物微粒，很难去除 微生物活体（细菌、病毒与热原体）；薄膜过滤是微孔筛分，大于孔径的 微粒均被截留，微生物粒子大小为0.5-2微米，只要选用0.45微米的微 孔滤膜即可将微生物截留去除，用0.22微米的微孔滤膜则可能将病毒、 热原体去除。。 注射用药液除用传统过滤器去除药液中的异物外，现已采用微孔 滤膜将澄清的药液再次除菌、除热原，其滤膜孔径最好在0.22微米以下。 制药空气的过滤亦因GMP的不同级别

19、要求而采用相应的器材、过滤器。 要指出的是，制药无菌空气的供应仅采用传统滤材、滤器往往不能达到要 求，其终端必须选用微孔薄膜，孔径必须在0。45微米以下。 注射用无菌药液的处理：按GMP要求，注射用药液应当无菌无热原，本 品药液配制好后，经过粗砂棒、细砂棒（适当使用滑石粉或碳粉）过滤 成澄明液后，再经过0.45微米多层微孔滤芯除菌，终端通过0.22微米 单层超微孔滤膜后上机灌装。 目前，用于过滤器常用的主要过滤材料大致有以下几种： 混合纤维素酯 常用来制成圆形的单片平板滤膜，用于液体和气体的精过滤；聚丙烯 (PP) 做成折叠式，常用于筒式过滤器，有较大的孔径，其具有亲水性，属 粗过滤

20、材料； 聚偏二氟乙烯(PVDF) 属精过滤材料，耐热和耐化学稳定，蒸汽灭菌承受性良好，可制成亲 水性滤膜，较广泛应用于制药工业无菌制剂用水与注射用水的过滤； 聚醮翱PES) 做成折叠式，常用于筒式过滤器，耐温耐水解性能好，亲水性材料， 用于精度较高的溶液的精过滤； 尼龙 做成折叠式，常用于筒式过滤器，亲水性材料，常用作液体的精过滤; 聚四氟乙烯(PTFE) 做成折叠式，常用于筒式过滤器，疏水性材料，其是使用相当广泛的 一种材料，耐热耐化学稳定，常用于水、无机溶剂与空气的精过滤。 除菌过滤器的特点 (1)除菌过滤器一般采用十字悬挂式，水平进出。多芯过滤器可设 计成落地式。

21、 (2)有些使用场合根据实际需要分成预过滤器、精过滤器两种。 (3)空气流向：从外向内穿过滤芯。 (4)进入除菌过滤器的压缩空气必须先经过至少三级的精密过滤器 与干燥机。除油、除水、除尘，油雾浓度应40.01PPM,否则将影响除菌 滤芯的寿命，达不到预期的除菌效果。 (5)定期杀菌，根据实际使用情况每周或每月1~2次，每次30分 钟，采用经过小过滤精度的洁净饱和蒸汽杀菌。蒸汽温度V14(TC,蒸汽 压力V0.3MP3阀门缓慢开关。 (6)作为罐体、设备的呼吸器使用时，其作用主要在于连通大气防 止设备内部负压和隔离开空气中的污染源，过滤方面的功能不大，因此在 过滤上基本无要求。 对胰岛

22、素进行除菌过滤后采用胰岛素冻干粉等冻干技术冻干，既得胰岛素 结晶。 经包装等工序后的成品。 如下图： 七、半成品检定 重组人胰岛素半成品检测（检测提取纯化后重组人胰岛素样品）： （一）杂质检定 1,有关物质：取本品适量，用O.Olmol/L盐酸溶液制成每1ml中含 3.5mg的溶液，作为供试品溶液。取供试品溶液20 1注入液相色谱仪， 记录色谱图，按面积归一化法计算，含A21脱酰胺人胰岛素不得过1.5%, 其他有关物质总量不得过2.0%。 2,高分子蛋白质：取本品适量，用0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中 含4mg的溶液，作为供试品溶液。按照分子排阻色谱法试验。以色

23、谱用 亲水改性硅胶为填充剂（5〜10 m）;冰醋酸-乙晴-0.1%精氨酸溶液（15: 20： 65）为流动相，流速为每分钟0.5ml,检测波长为276nm。取重组 人胰岛素单体-二聚体对照品，用O.Olmol/L盐酸溶液制成每1ml中含 4mg的溶液；取100 1注入液相色谱仪，重组人胰岛素单体与二聚体的 分离度应符合要求。取供试品溶液100 1,注入液相色谱仪，记录色谱图， 除去保留时间大于人胰岛素主峰的其它峰面积，保留时间小于人胰岛素主 峰的所有峰面积之和不得过L0%。 3,锌：对照品溶液的制备 精密量取锌标准溶液（lOOOug/ml） 5ml, 置100ml量瓶中，加O.Olmol/L

24、盐酸溶液至刻度，摇匀。供试品溶液的 制备 精密称取本品适量，用0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含锌约 0.4~0.8阳 的溶液，摇匀。测定法精密量取对照品溶液，用O.Olmol/L 盐酸溶液分别稀释成每1ml锌含量为0.20砥、0.40口g、0.60pg. 0.80日 g、l.OOpg的溶液。将上述各溶液与供试品溶液，照原子吸收分光光度法, 在213.9nm的波长处测定，按干燥品计，含锌量不得过1.0%。 4,炽灼残渣：取本品约0.2g,依法检查，遗留残渣不得过2.0%。 （二）效价测定：按照高效液相色谱法测定 取本品适量，精密称定，用0.01mol/L盐酸溶液定量稀释至每1ml

25、 中约含10单位的溶液（临用新配）。精密量取20 1注入液相色谱仪， 记录色谱图；另取重组人胰岛素对照品适量，同法测定。按外标法以人胰 岛素峰面积（包括A21脱酰胺峰面积）计算，即得。 （三）胰岛素生物测定法 本法系比较胰岛素标准品(S)与供试品(T)引起小鼠血糖下降的 作用，以测定供试品的效价。 标准品溶液的制备：精密称取胰岛素标准品适量，按标示效价，加入每 100ml中含有苯酚0.2g并用盐酸调节pH值为2.5的0.9%氯化钠溶液, 使溶解成每1ml中含20单位的容易忘，4~8(贮存，以不超过5天为宜。 标准品稀释液的制备试验当日，精密量取标准品溶液适量，按高低剂量 组(ds2 ,

26、 dsj)加0, 9氯化钠溶液(pH2. 5)制成两种浓度的稀释液，高低剂 量的比值①不得大于l：0. 5o高浓度稀释液一般可制成每1 ml中含0. 06八’0. 12单位，调节剂量使低剂量能引起血糖明显下降，高剂量不致差 别。 供试品溶液与稀释液的制备按供试品的标示量或估计效价(AJ,照标 准品溶液与其稀释液的制备法制成高、低两种浓度的稀释液，其比值①应 与标准品相等，供试品与标准品高低剂量所致的反应平均值应相近。 测定法取健康合格、同一来源、同一性别、出生日期相近的成年小鼠, 体重相差不得超过3g,按体重随机等分成4组，每组不少于10只，逐只 编号，各组小鼠分别自皮下注人一种浓度的标准

27、品或供试品稀释液，每鼠 0. 2八0. 3ml,但各鼠的注射体积(ml)应相等。注射后40分钟，按给药 顺序分别自眼静脉丛采血，用适宜的方法，如葡萄糖氧化酶一过氧化酶法 测定血糖值。第一次给药后间隔至少3小时，按双交叉设计，对每组的各 鼠进行第二次给药,并测定给药后40分钟的血糖值。照生物检定统计法(附 录XIV)中量反应平行线测定双交叉设计法计算效价与实验误差。 本法的可信限率(FL%)不得大于25 % (四)注射液检测 1,渗透压摩尔浓度：除另有规定外，静脉输液与椎管注射用注射液按 各品种项下的规定，照渗透压摩尔浓度测定法检查，应符合规定。 2,可见异物：除另有规定外，照可见异物检

28、查法检查，应符合规定。 3,不溶性微粒：除另有规定外，溶液型静脉用注射液、注射用无菌粉 末与注射用浓溶液照不溶性微粒检查法检查，均应符合规定。 3,无菌：按照无菌检查法检查，应符合规定。 4,细菌内毒素或热原：除另有规定外，静脉用注射剂按各品种项下的 规定，照细菌内毒素检查法或热原检查法检查，应符合规定。 热原(pyrogen) 1 .热原的定义：注射后能引起人体特殊致热反应的物质。 2 .热原的组成：热原是微生物的代谢产物，是微生物的一种内 毒素，大多数细菌都能产生热原，革兰氏阴性杆菌致热力最强。热原由磷 脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物，其中脂多糖是致热活性中心。脂多 糖组成因

29、菌种的不同而异，热原的分子量106左右。 3 .热原的危害：含热原的注射剂输入人体后，约半小时人体就发 冷、寒战、体温升高、全身痛、出汗、恶心呕吐等，严重时高烧40度、 昏迷、虚脱、甚至死亡。 八、成品检定 重组人胰岛素成品检测(即检测重组人胰岛素注射液样品)： 本品为重组人胰岛素的无菌水溶液。其效价应为标示量的90.0%〜 110.%。 本品可加入适量的苯酚或间甲酚作抑菌剂。 【鉴别】 (1)取本品，按照重组人胰岛素项下的鉴别项试验，显相同的结果。 (2)在苯酚或间甲酚检查项下记录的色谱图中，供试品溶液中苯酚峰或 间甲酚峰的保留时间应与苯酚或间甲酚对照品的保留时间一致。 【

30、检查】 1,有关物质 取本品，每1ml中加9.6mol/L盐酸溶液3位酸化，混 匀后作为供试品溶液；取供试品溶液适量(约相当于人胰岛素2单位)， 按照重组人胰岛素项下的方法检查，扣除苯酚峰和间甲酚峰，按面积归一 化法计算，A21脱酰胺人胰岛素不得过2.0%,其他有关物质总量不得过 6.0%0 2,高分子蛋白质 取本品，每1ml加9.6mol/L盐酸溶液3pL酸化， 混匀后作为供试品溶液；取供试品溶液100PL,按照重组人胰岛素项下方 法检查，除去保留时间大于人胰岛素主峰的其它峰面积，保留时间小于人 胰岛素主峰的所有峰面积之和不得过2.0%。 3,锌： 取本品适量，用O.Olmol/L盐

31、酸溶液制成每1ml含锌约0.4〜 0.8四的溶液作为供试品溶液,按照重组人胰岛素项下的方法检查，每100 单位中含锌量应为10〜40pg。 4,苯酚或间甲酚： 取苯酚或间甲酚（纯度）99.5%）,精密称定，用 0.01mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1ml中约含苯酚或间甲酚 0.25mg的溶液，作为苯酚或间甲酚对照品溶液；精密量取本品适量，用 0.01mol/L盐酸溶液定量稀释成每1ml约含苯酚或间甲酚0.25mg的溶 液，作为供试品溶液。按照重组人胰岛素效价测定项下方法检查，检测波 长为270nmo取重组人胰岛素对照品适量，用苯酚或间甲酚对照品溶液 制成每1ml中含重组人胰岛素Img的溶液

32、，取20口1注入液相色谱仪， 苯酚峰、间甲酚峰与人胰岛素主峰的分离度应符合要求。精密量取苯酚或 间甲酚对照品溶液与供试品溶液各20PL,分别注入液相色谱仪，记录色 谱图，按外标法以峰面积计算。每1ml含苯酚或间甲酚应为2.00〜 2.75mgo 九、包装 生物制品包装规程 1 .同一车间有数条包装生产线同时进行包装时，各包装线之间应有隔离设 施。外观相似的制品不得在相邻的包装线上包装。每条包装线均应标明正 在包装的药品名称、批号。 2 .药品的内包装和外包装标签的内容、格式应符合国家药品监督管理部门 的有关规定。 3 .包装制品应在25七以下进行。有专门规定者应按各论执行。 4 .瓶签要求贴牢，直接印字的制品要求字迹清楚，不易脱落或模糊，瓶签 内容不得用粘贴、剪贴的方式进行修改或补充。 5 .制品包装全部完成后，在未收到产品合格证前，应在待检区封存。收到 合格证后，方可填写入库单，交送成品库。 6 .每个最小包装盒内均应附有药品说明书。 7 .药品说明书应符合《中华人民共和国药品管理法》与国家药品监督管理 部门对药品说明书的规定，并根据国家药品监督管理部门批准的内容编 写。 小组成员： 沈迪、曾宇、屠言贝、张铉英、张寒光、温馨、谢丹、王亮杰、郭正兵、 周明毅 查资料：全体 ppt制作：沈迪 文稿：张铉英