胶体金法各种方法法原理
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1、 真诚为您提供优质参考资料,若有不当之处,请指正。 金-F14A-FABP 羊抗鼠IgG 双抗体夹心法原理 以FABP为例(检测抗原) 金-F14A-羊抗鼠IgG 样品(血清)含FABP蛋白 阳性反应 金-F14A-FABP 金-F14A-FABP-F14A 金标记F14A抗体 显示红色 显示红色 阳性反应 阴性反应 金-F14A-羊抗鼠IgG 不显色 显示红色 金标记F14A抗体 Y1=F14A(标记了胶体金) Y2=F104B(固定在NC
2、膜上即T线) Y3=羊抗鼠IgG(固定在NC膜上即C线) 此方法较常用,主要用于较大分子量的蛋白(抗原)的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目是双抗原夹心检测抗体的,原理类似。 竞争法原理 1 / 3 以吗啡为例(检测抗原) 阳性反应 金-吗啡抗体-吗啡 显示红色 不显色 吗啡-BSA 金-吗啡抗体-吗啡 羊抗鼠 金标记吗啡抗体 样品(尿液)含吗啡 阳性反应 阴性反应 阴性尿液抗体-吗啡
3、 羊抗鼠 金-吗啡抗体-羊抗鼠 金标记吗啡抗体 显示红色 显示红色 Y1=胶体金标记的吗啡单抗 Y2=吗啡-BSA偶联物 Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原(毒品、农药、肽链等)的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC膜上,常常用化学方法把小分子偶联到BSA等大分子物质上再固定于NC膜上。此结果与双抗原夹心法相反,阴性CT两条都是红线,阳性只有C线一条红线。 间接法原理 显示红色 显示红色 以HIV为例(检测抗体) 不显色 显示红色 此方法主要用于血清中抗体检测,纯化或者重组的抗原固定于NC膜上,标记多为蛋白A(ProteinA或叫SPA,抗体Fc端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金过量,一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。 斑点免疫渗滤法使用就是间接法。 温馨提示:最好仔细阅读后才下载使用,万分感谢!
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