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1、LBA4404根癌农杆菌
编号
名称
北京华越洋生物NRR01270
LBA4404根癌农杆菌
基本信息：
名称：LBA4404根癌农杆菌
规格：300ul甘油菌
储存温度：・809
类别：根癌农杆菌
抗性：Rif,Str
培养基：YEB或LB
培养方式： 289,有氧
保存方式： 30%甘油，・809
基因型：Ach5 （rif R） Ti pAL4404 （strepR） Octopine
菌株简介：
LBA4404菌株为Ach5型背景，核基因中含有筛选标签一一利福平抗性 基因rif,为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型
Ti质粒pA
2、L4404,此质粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因 组必需的元件，PAL4404质粒自身的T・DNA转移功能被破坏，但可以帮助
转入的双元载体T-DNA顺利转移）。PAL4404型Ti质粒含有筛选标签:
strep,赋予LBA4404菌株链霉素抗性，适用于菸草、番茄、烟草等植物
的转基因操作。
操作说明：
1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表 面薩取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数 的增加，细菌的活力会逐渐下降。
2, 为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划半板，然后再挑单克隆 菌落进行后续操作。
3、
冷冻管开封：
用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌株复溶：
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取1ml左右复溶液，加入到冷冻 管中。轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮：
用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培 养。细菌在30-35€培养箱中培养24-48h,真菌在23-28°C培养箱中培养24-72h （必要时，可适当延长培养时间）。
菌株传代：
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的I古I体培养基及液体培养基中（尽最 增大接种量：如用无菌吸管吸収M50M新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓 慢释放），适宜温度下培养，用以
4、菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注意事项：
1、 菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放 置会导致菌种衰退：
2、 冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；
3、 一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能 正常生长；
4、 苛养曲的培养盂采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时來 电询问：
5、 某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧 状态；培养过程中亦要保持厌氧状态；
6、 某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促 进生长；
7、 如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。
8、 部分菌种有致病性、扩散性，请专业人员在专业环境下有保护性操作。
保藏条件：
・20・C保存（复溶液于2-8-C保存）
保藏时间：
2-10年，应根据菌种状况及时转接
LBA4404根癌农杆菌使用说明
