XL1-Blue大肠杆菌菌株使用说明


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1、XLl-Blue大肠杆菌菌株 编号 名称 北京华越洋生物NRR00690 XLl-Blue大肠杆菌菌株 基本信息: 名称:XLl-Blue大肠杆菌菌株 规格:300ul甘油菌 储存温度:-80C 基因组: recAl endAl gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relAl lac [F‘ proAB laclqZAM15TnlO(Tef)] 简介: XLl-Blue菌株能保证高拷贝质粒稳定复制,recAl和endAl的突变有 利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。hsdR17突变导致EcoK 核酸内切酶系统缺失,增强了外源DNA的稳定性和提
2、取质量。lacIqZAM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。对XLl-Blue使用LB,在37C 有氧的环境下培养,429热激处理可将质粒成功转入XLl-Blue中。 XLl-Blue具有四环素抗性。 操作说明: 1, 本品包•含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面薩 取少屋涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数 的增加,细菌的活力会逐渐下降。 2, 为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划半板,然后再挑单克隆菌落 进行后续操作。 冷冻管开封: 用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。 菌株复溶: 无菌环境中旋开装有
3、芨溶液的滴瓶盖,吸取1ml左右复溶液,加入到冷冻管中。 轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。 菌株复壮: 用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。做好标识,在适宜温度下培养。 细菌在30-35C培养箱中培养24-48h,真菌在23-28C培养箱中培养24-72h (必要时,可适当延长培养时间)。 菌株传代: 冷得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量增大 接种最:如用无菌吸管吸取M50M新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓 慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。 注意事项: 1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间
4、室温下放 置会导致菌种衰退; 2、 冷冻管开封、冻干粉复洛、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行; 3、 一些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,部分需连续两次继代培养才能 正常生长; 4、 苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基,敬诸正确选择,不清楚时来 电询问; 5、 某些厌氧菌的培养,自开封到接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧 状态;培养过程中亦要保持厌氧状态; 6、 某些菌种,如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促 进生长; 7、 如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况,应停止使用对应产品。 8、 部分菌种有致病性、扩散性,谙专业人员在专业环境下有保护性操作。 保藏条件: -20-C保存•(复溶液于2-8C保存) 保裁时间: 2-10年,•应根据菌种状况及时转接
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