胶体金法各种方法法原理
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1、双抗体夹心法原理 Y3二羊抗鼠IgG (固定在NC膜上即C线) 此方法较常用,主要用于较大分子量的蛋口(抗原)的检测。要求两株抗体针对一个 抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项LI是双抗原夹心检测抗体的,原理类似。 竞争法原理 以吗啡为例(检测抗原) 金•吗啡抗体■羊抗鼠 阴性尿液 阳性
2、反应 / r c 4 金标记吗啡抗体 显示红色 显示红色 Yl=胶体金标记的吗啡单抗 Y2二吗啡-BSA偶联物 阴性反应 Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原(毒品、农药、肽链等)的检测。山于抗原分子量小不能 直接固定于NC膜上,常常用化学方法把小分子偶联到BSA等大分子物质上再固定于 NC膜上。此结果与双抗原夹心法相反,阴性CT两条都是红线,阳性只有C线一条红 线。 间接法原理 以HIV为例(检测抗体) 显示红色 显示红色 •鱼也 • protein A 此方法主要用于血清中抗体检测,纯化或者重组的抗原固定于NC膜上,标记多为蛋 口 A(ProteinA或叫SPA,抗体Fc端结合而与其它蛋口质不结合)。此方法要求胶体金 过量,一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。 斑点免疫渗滤法使用就是间接法。 如有侵权请联系告知删除,感谢你们的配合!
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