pPICZαA质粒图谱

上传人:简****9 文档编号:60581435 上传时间:2022-03-08 格式:DOCX 页数:8 大小:100.04KB
收藏 版权申诉 举报 下载
pPICZαA质粒图谱_第1页
第1页 / 共8页
pPICZαA质粒图谱_第2页
第2页 / 共8页
pPICZαA质粒图谱_第3页
第3页 / 共8页
资源描述:

《pPICZαA质粒图谱》由会员分享,可在线阅读,更多相关《pPICZαA质粒图谱(8页珍藏版)》请在装配图网上搜索。

1、出品公司: 载体名称: 质粒类型: 表达水平: 启动子: 克隆方法: 载体大小: 5'测序引物及序列 3'测序引物及序列 载体标签: 载体抗性: 筛选标记: 备注: 产品目录号: 稳定性: 组成型: 病毒/非病毒: pPICZaa载体基本信息 Invitrogen pPICZalphaA,pPICZaA,pPICZalphaA,pPICZ“A,pPICZaA, pPICZa-A 毕赤酵母蛋白表达载体 高拷贝 AOX1 多克隆位点,限制性内切酶 3593bp 5AOX1:5-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3' 3AOX1:5

2、-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3' C-Myc,C-His Zeocin博来霉素 HIS4 插入基因是必需包含起始密码子ATGo V195-20 稳定Stable 组成型Constitutive 非病毒 c-mycepitope6xHis 一eqx二ON一一。(tjs♦一OCX一3一8;dco<-cnESCQ 一汽二Ed-zo。山*薨<-eo a-factor MultipleCioningBelowisthemu

3、ltiplecluninmsitetorpllc'ZaA.RestrictionsitesarelabeledtoSiteofpPICZaAindicatethecleavagesite.Thebox叩niielectidesindicatethevanableregion. ThemultipLccloningsiteliasbeenconfirmedbvsequencingandfunctionaltestin4(hecompleteseqiienceofpPtC-ZirAh

4、kalSupport(seepageForamapandadescriptionofthefeaturesofpPICZarefertopages21-22. 5end01AOX1mRHA5\4QX7primigsite MlIAACCTTTTTTTTTATCATCATTATTAGCTTACTTTCATAATTGCGACTGGTTCCAATTGA I CAA^CTU'I'TGATTTTAACGACTrTTAACGACAACTTGAGAA.GATCAAAAAACAACTAATT ATTCGAAACGATGA随TTTCCTTCAATTTTTACTGCTGTTTTATTCGCAGCAMet

5、ArgPheProSerHePheThrALaVaiLeuPheAlaAla W3TCCTCCGCATTAGCTGCTCCAGTCAACACTACAA2AGAAGATGAAACGGCA SerSerAlaLeuAlaAlaProVaiAsnThrTtirThrGluAspGluThrAla u-factorsignalsequence KHICAAATTCCGGCTGAAGCTGTCATCGGTTACTCAGATTTAGAAGGGGATTTC GinlieProAlaGluAlaVaiILeGlyTyrSerAspLeuGluGlyAspPhe H1K5GATGTTGCTGTTTT

6、GCCATTTTCCAACAGCACAAATAACGGGTTATTGTTT AspVaiAl3Va1LeuProPheSerAsnSerThrAsnAsnGlyL仁uLeuPile Xhor 115ftATAAATACTACTATTGCCAGCATTGCTGCTAAAGAAGAAGGGGTAICTCTClieAsnThrT^trlieAisSerHeAlaAlaL7sGluGinGlyVaiSerLeu Kex2由gn\cleavage产R|PnHSfi\酶严IAspT^I 118r ]2bl GAGj\AAAGATGAGGCTGAAGC^GAAITCACGTGGCCCAGCCG

7、GCCGTCTCGGATCGGTGluLygArgGluAla^GluAla^ S也signalcleavage KpnIXboISacIINotIXteIomyew闭ope ACCTCGAGCCGCGGCGGCCGCCAGCTTTCTAGAACAAAAACTCATCTCAGAAGAG CLuGinLysLeulieSerGluGlupdyhstidinetag1I1 I2,JL>GATCTGAATAGCGCCGTCGACCATCATCAT*CATCATCATTGAGTTTGTAGCCAspLeuAsnSerAlaVaiAgpHisHisHisHisHisHis*** 1351TT

8、AGACATGACTGTTCCTCAGTTCAAGTTGGGCACTTACGAGAAGACCGGTCTTGCTAGA3"A0X1primingsits Ml'lTTCTAATCAAGAGGATGTCAGAATGCCATTTGCCTGAGAGATGCAGGCTTCATTTTTGAT3'tJOlyaoefi/latioriEite bFIACTTTTTTATTTGTAACCTATATAGTATAGGATTTTTTTTGTckTTTTGTTTCTTCTCGT 'Tovourproteinwithnati\eM-teriiunui,vouinu^tLisePLRandutilizethe X/

9、w]siteupstreaji'LcitheKex2cleavagesitetccloneynur^eneflushwitihtheKex2 sitelset?p*i^e4formnredet3i]s pPICZaA,B和C是3.6kb的毕赤酵母蛋白分泌表达载体。表达的重组蛋白是融合蛋白,含 有一个N-端多肽,编码酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)”-因子分泌信号。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水平的表达目的蛋白,并且可以用在任何毕赤酵母中,包才X33, GS115菌株,SMD1168H,KM71H。 pPICZaA,B和C系列载体包含以下元素: ?5

10、'端含有AOX1启动子的严格调控,利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因(Ellis等,1985;Koutz 等人,1989;tschopp等人,1987A)。 ?0-因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。 ?Zeocin抗性基因在大肠杆菌(Escherichiacoli)和毕赤酵母都能用于筛选(Baron等人,1992; Drocourt等人,1990)。 ?C-端含Myc和His标签,可以用于检测和纯化重组蛋白。 ?pPICZA,B,C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。 pPICZaa载体序列 LOCUSpPICZAA3593bpDNAcircularSYN2

11、-SEP-2003 SOURCE ORGANISM COMMENTThisfileiscreatedbyVectorNTI COMMENTVNTAUTHORNAME|| FEATURESLocation/Qualifiers source1..3593 /invitrogen="25" /vntifkey="98" primercomplement(1423..1443) /invitrogen="1880000" /vntifkey="27" /label=3'\AOX1\primer primer855..875 /invitrogen="1890000"

12、 /vntifkey="27" /label=5'\AOX1\primer CDS1320..1337 /invitrogen="1010000" /vntifkey="4" /label=6xHis primer1144..1164 /invitrogen="1900000" /vntifkey="27" /label=alpha-factor\primer terminator1341..1682 /invitrogen="2550000" /vntifkey="43" /label=AOX1\transcription\terminator CDS1275..

13、1304 /invitrogen="1090000" /vntifkey="4" /label=c-myc\epitope terminator2538..2855 /invitrogen="2560000" /vntifkey="43" /label=CYC1\transcription\terminator promoter2095..2162 /invitrogen="2340000" /vntifkey="30" /label=EM7\promoter misc_feature1208..1274 /invitrogen="1460000" /vntifke

14、y="21" /label=MCS rep_origincomplement(2866..3539) /invitrogen="2540000" /vntifkey="33" /label=pUC\origin CDS941..1207 /invitrogen="1280000" /vntifkey="4" /label=alpha-factor\signal\peptide promoter1683..2094 /invitrogen="2300000" /vntifkey="29" /label=TEF1\promoter CDS2163..2537 /inv

15、itrogen="1370000" /vntifkey="4" /label=Zeo(R) promoter1..940 /invitrogen="2160000" /vntifkey="29" /label=AOX1\promoter BASECOUNT892a886c801g1014t ORIGIN 1agatctaacatccaaagacgaaaggttgaatgaaacctttttgccatccgacatccacag 61gtccattctcacacataagtgccaaacgcaacaggaggggatacactagcagcagaccgt 121tgcaaacg

16、caggacctccactcctcttctcctcaacacccacttttgccatcgaaaaacc 181agcccagttattgggcttgattggagctcgctcattccaattccttctattaggctacta 241acaccatgactttattagcctgtctatcctggcccccctggcgaggttcatgtttgttta 301tttccgaatgcaacaagctccgcattacacccgaacatcactccagatgagggctttctg 361agtgtggggtcaaatagtttcatgttccccaaatggcccaaaactgac

17、agtttaaacgct 421gtcttggaacctaatatgacaaaagcgtgatctcatccaagatgaactaagtttggttcg 481ttgaaatgctaacggccagttggtcaaaaagaaacttccaaaagtcggcataccgtttgt 541cttgtttggtattgattgacgaatgctcaaaaataatctcattaatgcttagcgcagtct 601ctctatcgcttctgaaccccggtgcacctgtgccgaaacgcaaatggggaaacacccgct 661ttttggatgattatgcattgtct

18、ccacattgtatgcttccaagattctggtgggaatact 721gctgatagcctaacgttcatgatcaaaatttaactgttctaacccctacttgacagcaat 781atataaacagaaggaagctgccctgtcttaaacctttttttttatcatcattattagctt 841actttcataattgcgactggttccaattgacaagcttttgattttaacgacttttaacga 901caacttgagaagatcaaaaaacaactaattattcgaaacgatgagatttccttcaatttt 9

19、61tactgctgttttattcgcagcatcctccgcattagctgctccagtcaacactacaacaga 1021agatgaaacggcacaaattccggctgaagctgtcatcggttactcagatttagaagggga 1081tttcgatgttgctgttttgccattttccaacagcacaaataacgggttattgtttataaa 1141tactactattgccagcattgctgctaaagaagaaggggtatctctcgagaaaagagaggc 1201tgaagctgaattcacgtggcccagccggccgtct

20、cggatcggtacctcgagccgcggcgg 1261ccgccagctttctagaacaaaaactcatctcagaagaggatctgaatagcgccgtcgacc 1321atcatcatcatcatcattgagtttgtagccttagacatgactgttcctcagttcaagttg 1381ggcacttacgagaagaccggtcttgctagattctaatcaagaggatgtcagaatgccatt 1441tgcctgagagatgcaggcttcatttttgatacttttttatttgtaacctatatagtatag 1501gatt

21、ttttttgtcattttgtttcttctcgtacgagcttgctcctgatcagcctatctcgc 1561agctgatgaatatcttgtggtaggggtttgggaaaatcattcgagtttgatgtttttctt 1621ggtatttcccactcctcttcagagtacagaagattaagtgagaccttcgtttgtgcggat 1681cccccacacaccatagcttcaaaatgtttctactccttttttactcttccagattttctc 1741ggactccgcgcatcgccgtaccacttcaaaacacccaagc

22、acagcatactaaattttccc 1801tctttcttcctctagggtgtcgttaattacccgtactaaaggtttggaaaagaaaaaaga 1861gaccgcctcgtttctttttcttcgtcgaaaaaggcaataaaaatttttatcacgtttctt tttcttgaaatttttttttttagtttttttctctttcagtgacctccattgatatttaag ttaataaacggtcttcaatttctcaagtttcagtttcatttttcttgttctattacaactttttttacttcttgttcattagaaa

23、gaaagcatagcaatctaatctaaggggcggtgttgacaattaatcatcggcatagtatatcggcatagtataatacgacaaggtgaggaactaaaccatggccaagttgaccagtgccgttccggtgctcaccgcgcgcgacgtcgccggagcggtcgagttctggaccgaccggctcgggttctcccgggacttcgtggaggacgacttcgccggtgtggtccgggacgacgtgaccctgttcatcagcgcggtccaggaccaggtggtgccggacaacaccctggcctgggtgtgggt

24、gcgcggcctggacgagctgtacgccgagtggtcggaggtcgtgtccacgaacttccgggacgcctccgggccggccatgaccgagatcggcgagcagccgtgggggcgggagttcgccctgcgcgacccggccggcaactgcgtgcacttcgtggccgaggagcaggactgacacgtccgacggcggcccacgggtcccaggcctcggagatccgtcccccttttcctttgtcgatatcatgtaattagttatgtcacgcttacattcacgccctccccccacatccgctctaaccgaaa

25、aggaaggagttagacaacctgaagtctaggtccctatttatttttttatagttatgttagtattaagaacgttatttatatttcaaatttttctt 3541 ttttttctgtacagacgcgtgtacgcatgtaacattatactgaaaaccttgcttgagaaggttttgggacgctcgaaggctttaatttgcaagctggagaccaacatgtgagcaaaaggccagcaaaaggccaggaaccgtaaaaaggccgcgttgctggcgtttttccataggctccgcccccctgacgagcatca

26、caaaaatcgacgctcaagtcagaggtggcgaaacccgacaggactataaagataccaggcgtttccccctggaagctccctcgtgcgctctcctgttccgaccctgccgcttaccggatacctgtccgcctttctcccttcgggaagcgtggcgctttctcaatgctcacgctgtaggtatctcagttcggtgtaggtcgttcgctccaagctgggctgtgtgcacgaaccccccgttcagcccgaccgctgcgccttatccggtaactatcgtcttgagtccaacccggtaagacacga

27、cttatcgccactggcagcagccactggtaacaggattagcagagcgaggtatgtaggcggtgctacagagttcttgaagtggtggcctaactacggctacactagaaggacagtatttggtatctgcgctctgctgaagccagttaccttcggaaaaagagttggtagctcttgatccggcaaacaaaccaccgctggtagcggtggtttttttgtttgcaagcagcagattacgcgcagaaaaaaaggatctcaagaagatcctttgatcttttctacgggg 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241 3301 3361 3421 3481 tctgacgctcagtggaacgaaaactcacgttaagggattttggtcatgagatc

展开阅读全文
温馨提示:
1: 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
2: 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
3.本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
5. 装配图网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

相关资源

更多
正为您匹配相似的精品文档

相关搜索

关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

copyright@ 2023-2025  zhuangpeitu.com 装配图网版权所有   联系电话:18123376007

备案号:ICP2024067431-1 川公网安备51140202000466号


本站为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的收益归上传人(含作者)所有。装配图网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容本身不做任何修改或编辑。若文档所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知装配图网,我们立即给予删除!